Форумы >> Обменяемся опытом >> Наличие кишечной палочки (Архив)                тему, страницу Наличие кишечной палочки Как сделать цитратный тест на наличие кишечной палочки? LM @ 21.10.2009 11:35 RE: Наличие кишечной палочки LM, Тест основан на способности некоторых микроорганизмов усваивать лимонную кислоту и ее соли в питательной среде, в то время как на другие группы микроорганизмов эти вещества действуют угнетающе. Посев на среду Козера описан в стандартном методе определения бактерий группы кишечной палочки. Типичные Е. СОІІ не утилизируют цитрат. Методы определения бактерий группы кишечной палочки по стандарту ММФ. Арбитражный метод. Готовят соответствующие разведения исследуемых продуктов. В качестве питательной среды применяют бульон — лактоза — бриллиантовый зеленый — желчь. По 10 мл I разведения продукта засевают в три пробирки с поплавками, содержащие по 10 мл среды удвоенной концентрации. Это соответствует содержанию 1 мл (1 г) продукта в каждой пробирке. По 1 мл I разведения засевают в три пробирки, содержащие 10 мл питательной среды и поплавки. Это соответствует содержанию 0,1 мл (1 г) образца продукта в каждой пробирке. Посев последующих разведений производят аналогично. Осторогйно перемешивают так, чтобы пузырьки воздуха не попали в поплавки. Делают, по крайней мере, три серии посевов, например 1; 0,1; 0,01 г. Посев выполняют таким образом, чтобы в засеянном максимальном разведении не было роста кишечной палочки. Засеянные пробирки выдерживают при температуре 30±1°С в течение 48±2 ч. После термостатироваиия из каждой пробирки петлей пересевают в пробирки с 10 мл питательной среды и поплавками. Посевы выдерживают при тех же условиях. Из всех пробирок, в которых обнаружено газообразование или рост без газа, производят пересев петлей в пробирки с питательной средой и поплавками. Посевы инкубируют при температуре 30±1°С в течение 48±2 ч. Затем посевы просматривают и из пробирок, в которых обнаружено газообразование, готовят микроскопический препарат. Образование газа и наличие в микроскопическом препарате грамотрицательных бактерий без спор указывают на присутствие бактерий группы кишечной палочки. Пробирки, в которых обнаружены бактерии группы кишечной палочки, учитывают. В соответствии с этим определяется наиболее вероятное число микроорганизмов (НВЧ) в исследуемом объеме продукта Если во всех засеянных пробирках обнаружено газообразование, анализ следует повторить с посевом более высокого разведения. Это можно сделать только для сухих продуктов или если образцы хранились при температуре 3±1°С. Определение с использованием жидкой питательной среды. Приготовление разведений производится в соответствии с табл. 154. В качестве питательной среды при.меняется бульон — лактоза — бриллиантовый зеленый — желчь. Пробирки с посевами термостатнруют 24±2 ч при 30±1°С. При анализе молока и .молочных продуктов, хранившихся на холоде или прошедших термическую обработку, время анализа увеличивают до 48±2 ч при температуре 30±ГС. По наличию газообразования в пробирках определяют количество бактерий группы кишечной палочки. Результаты выражают в наличии или отсутствии бактерии группы кишечной палочки в исследуемых количествах продукта, т. е. в 1, 0,1 или 0,01 мл (г) образца. Определение с использованием плотной питательной среды. Приготовление разведений производится в соответствии с табл. 154. В качестве питательной сре.іьі применяют фиолетовыйкрасный — желчь — агар. По 1 мл жидких молочных продуктов или исследуемых разведений вносят в чашки Петри. Затем в эти же чашки заливают по 10 мл расплавленного и охлажденного до 40—45°С фиолетового красного — желчь — агара. Немедленно после заливки среду тщательно перемешивают с инокулятом. После застывания агара заливают еще 4 мл расплавленной среды. После застывания агара чашки с посевами инкубируют при температуре 30±1° в течение 24±2 ч. После термостатирования подсчитывают количество колоний красного цвета размером до 0,5 мм, характерных для бактерий группы кишечной палочки. Результат выражают в количестве бактерий, содержащихся в 1 мл или I г продукта. Pegas @ 22.10.2009 14:13 Всего записей: 2 | Показаны: [1 - 2]