Форумы >> Обменяемся опытом >> Окраска микробов (Архив)                тему, страницу Окраска микробов Чем можно окрасить микробы? maman @ 10.03.2011 12:34 RE: Окраска микробов maman, Методы окраски микробов разнообразны. Их можно разделить на две группы: ориентировочная простая окраска и окраска дифференциальная, выявляющая химические н структурные особенности микроорганизмов. Ориентировочная окраска. Для ориентировочной окраски препаратов используют разведенный карболовый фуксин Циля (1 : 10), продолжительность окрашивания 10—30 с; раствор Леффлера, продолжительность окрашивания 3—10 мин; спиртоводный раствор метиленового голубого, продолжительность окрашивания 3—5 мин; водный раствор метиленового голубого, продолжительность оїсрашивания 5—10 мин. Для окрашивания препаратов из молока предпочтительнее пользоваться растворами, содержащими метиленовый голубой, так как в этом случае можно получить отчетливо различимые мнкроорганиз.мы синего цвета, а фон (молоко) окрашивается в бледноголубой цвет. Дифференциальная окраска. Наиболее употребимой дифференциальной окраской является окраска по Граму. При этом способе выявляется способность бактерий удерживать краситель или обесцвечиваться в спирте, что связано с химической структурой микробной клетки. На фиксированный мазок накладывают кусочек фильтровальной бумаги и иа нее наливают карболовый раствор таким образом, чтобы смочилась фильтровальная бумага, и выдерживают 0,51 мин. Краситель сливают и, не смывая, наливают 3—4 капли раствора Люголя, выдерживают 1 мин. После этого раствор Люголя сливают и прополаскивают препарат в 96%ном спирте в течение 0,5—1 мин до тех пор, пока не смоется весь краситель. Затем млзок промывают водой и окрашивают разведенным фуксином. Для этого капают 3—4 капли и выдерживают 0,5—1 мин. Сливают фуксин, промывают мазок водой и просушивают препарат фильтровальной бумагой. Pegas @ 11.03.2011 12:21 RE: Окраска микробов Можно не красить, а определить визуально... При мастите, туберкулезе, ящуре и некоторых других болезнях молоко приобретает желтый или голубоватый оттенок. Чудесная палочка, а также заболевание сибирской язвой (в конце периода), геморрагическим маститом и другими болезнями окрашивают молоко в красный цвет. Некоторые микрококки и бациллы изменяют консистенцию молока : оно становится вязким, тягучим. При мастите в молоке появляются хлопья. Наибольшую опасность представляют инфекционные болезни животных, передаваемые через молоко . Патогенные микробы в молоко попадают от больных животных, из окружающей среды во время его транспортирования или переработки. Микробы , передаваемые через молоко , делят на две группы. В первую группу входят возбудители зооантропонозов -- болезней, общих для животных и человека. К ним относятся туберкулез, бруцеллез, ящур и др. Во вторую группу входят возбудители антропонозов -- болезней, которые передаются от человека человеку (дизентерия, дифтерия, брюшной тиф, скарлатина). Туберкулез -- хроническая болезнь, возбудитель которой вместе с молоком выделяется во внешнюю среду. В такой среде микобактерии сохраняются до 10 дней, а в сливочном масле на холоде -- до 300, в сырах --до 200 дней. При туберкулезе вымени происходит изменение молока: оно становится зеленовато-желтоватым, с хлопьями. Такое молоко подвергают кипячению и используют животным при откорме. Бруцеллез -- хроническая болезнь. В охлажденном молоке бруцеллы сохраняются до 8 дней, в замороженном--до 60, в сквашенном -- до 4, в сливках -- до 10, в масле -- 40--60, в сырах -- до 40 дней. Бруцеллы чувствительны к высокой температуре: при 65оС они погибают через 15 мин, при 70оС --через 5 мин. Молоко от больных животных пастеризуют при 70 °С в течение 30 мин. Ящур -- острая сильноконтагиозная болезнь. Вирус ящура в свежем молоке сохраняется до 12 часов, в охлажденном --до 2 недель. Молоко от больных ящуром животных пастеризуют при температуре 80 °С в течение 30 минут или кипятят в течение 5 минут. Обеззараженное молоко перерабатывают в топленое масло или используют в корм животным. Сальмонеллезы - острые желудочно-кишечные болезни, вызываемые сальмонеллами и их токсинами, которые вместе с молоком могут попадать в организм человека. Источники загрязнения молока сальмонеллами -- больные животные, корма, вода, а также обслуживающий персонал. Люди, переболевшие сальмонеллезом, могут оставаться длительное время бактерионосителями. Мастит (воспаление вымени) может быть вызван микробами , которые проникли в молочную железу. Более 90 % инфекционных маститов вызывают стафилококки и стрептококки. Энтеротоксигенные стафилококки могут быть причиной тяжелых отравлений людей, особенно детей. new @ 15.03.2011 12:21 RE: Окраска микробов maman, Специальные окраски микробов Окраска по Граму в модификации А. И. Синева. Заготовляют полоски фильтровальной бумаги, пропитанной 1%ным спиртовым раствором кристаллвиолета и высушенной. На препарат накладывают такую полоску (меньше предметного стекла) и набивают 2—3 капли воды. Окрашивание длится 2 мин, после чего снимают фильтровальную бумагу пинцетом и наливают 3—4 капли раствора Люголя, выдерживая препарат 1 мин. Затем его обесцвечивают спиртом и окрашивают разведенным фуксином з течение 0,5—1 мин. Фуксин сливают, мазок промывают водой и просушивают препарат фильтровальной бумагой. Окраска по Граму в модификации Г. П. Калин ы. На чистое и охлажденное после фла.мбирования предметное стекло наносят петлей каплю дистиллированной воды, в которую вносят также петлей небольшое количество агаровой культуры, не размешивая в воде. При приготовлении препарата из жидкой культуры на стекло наносят каплю, затем вносят также петлей каплю реактива 1. Смесь распределяют на участке площадью примерно 1 см, подсушивают при комнатной температуре и фиксируют, медленно проводя один раз через пламя горелки. На одном стекле можно готовить по 8—10 мазков, отделяя их один от другого линиями, проведенными с лицевой стороны стекла. Препарат ополаскивают водой и тщательно просушивают фильтровальной бумагой. После просушивания на препарат наносят с избытком реактив 2 так, чтобы жидкость покрыла всю поверхность стекла. Продолжительность окрашивания составляет 0,5—1 мин. После окрашивания препарат быстро ополаскивают проточной водой, направляя струю под углом на стекло, помещенное вертикально. Препарат высушивают фильтровальной бумагой и просматривают под микроскопом с иммерсионной системой. Микробы, которые окрашиваются по Граму (грамположительные), будут темнофиолетового цвета, микробы, которые не окрашиваются по Граму (грамотрицательные), имеют красный цвет. new @ 18.03.2011 12:00 Всего записей: 4 | Показаны: [1 - 4]